Les oligodendrocytes sont-ils concernés par l'accumulation d'alpha-synucleine pathologique dans le cerveau de souris TGM83 : études immunohistochimiques comparées - Archive ouverte HAL Access content directly
Journal Articles Revue Française d'Histotechnologie Year : 2015

Les oligodendrocytes sont-ils concernés par l'accumulation d'alpha-synucleine pathologique dans le cerveau de souris TGM83 : études immunohistochimiques comparées

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Julie Valantin
  • Function : Author
A. Bencsik

Abstract

To study the possible impact of chemical substances, like pesticides or nanoparticules (NP), on human neurodegenerative diseases associated to abnormal expression of the alpha-synuclein protein (Parkinson’s disease, Lewy body dementia, multi-systematized atrophy), our laboratory uses experimental analogues. Among them the C57Bl/6 wild-type mouse line and the TgM83 transgenic mouse line that expresses a mutant A53T form of human alpha-synuclein are studied. Realistic expo-sures are performed using oral route. First histological analyses of brains of exposed TgM83 mice reveal the presence of gliosis, brain inflammation as well as accumulation of pathological form of alpha-synuclein. Beside classical neuronal expression of this abnormal alpha-synuclein in various gray matter areas, a labeling identified in the white matter points out that oligodendrocytes may be also concerned by the alpha-synuclein related disorder. This observation evokes the typical labeling reported in the brain of humans with multi-systematized atrophy. Thus to test the assumption of a possible implication of the oligodendrocytes in the pathological accumulation of alpha-synuclein in the TgM83 model, we set up a protocol of oligodendrocyte detection using immunohistochemistry. Here we report the optimal conditions determined for an application on fixed paraffin embedded tissue samples that was used consecutively in a strategy of multiple labeling. To deal with a major methodological difficulty resting on the use of primary antibodies produced in the same species, we tested the use of a dedicated commercial kit. We report here not only the principle and details of application of this kit, but also the advantages and the limits identified.
Pour évaluer le rôle de substances chimiques potentiellement neurotoxiques, comme les pesticides ou les nanoparticules (NP), dans les maladies neurodégénératives humaines associées à l’alpha-synucléine (maladie de Parkinson, démence à corps de Lewy, atrophie multi-systématisée), notre laboratoire s’appuie sur l’étude d’analogues expérimentaux. Des expositions réalistes par voie alimentaire sont menées sur des lignées de souris sauvage C57Bl/6 et transgénique TgM83, celle-ci exprimant une alpha-synucléine humaine mutée A53T. Dans les études pilotes de l’impact potentiel des NP sur les maladies neurodégénératives, l’analyse histopathologique des cerveaux des souris exposées se traduit par l’apparition d’une gliose réactionnelle, d’une inflammation cérébrale, et d’une accumulation d’alpha-synucléine pathologique. Si le plus souvent le marquage immunohistochimique de cette alpha-synucléine pathologique concerne diverses régions de substance grise et témoigne d’une accumulation intraneuronale, un marquage identifié dans la substance blanche rappelant celui des oligodendrocytes a aussi été observé sur quelques cerveaux de souris de la lignée TgM83 exposées aux NP. Cette observation évoque le marquage rapporté pour un type d’alpha-synucléinopathies humaines, l’atrophie multi-systématisée. Ainsi pour éprouver l’hypothèse d’une implication possible des oligodendrocytes dans l’accumulation d’alpha-synucléine pathologique dans le modèle TgM83, nous avons mis en place un protocole de détection immunohistochimique des oligodendrocytes, en déterminant les conditions optimales (démasquages antigéniques et dilution) avant de l’appliquer dans une stratégie de marquages multiples. Pour faire face à une difficulté méthodologique reposant sur l’usage d’anticorps primaires produits chez la même espèce, nous avons testé l’usage d’un kit dédié. Nous rapportons ici les modalités d’application de ce kit en soulignant les avantages mais aussi les limites identifiées de ce kit.
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Dates and versions

anses-01874783 , version 1 (18-04-2019)

Identifiers

  • HAL Id : anses-01874783 , version 1

Cite

Julie Valantin, A. Bencsik, Mickael Leboidre. Les oligodendrocytes sont-ils concernés par l'accumulation d'alpha-synucleine pathologique dans le cerveau de souris TGM83 : études immunohistochimiques comparées. Revue Française d'Histotechnologie, 2015, 27 (1), pp.29-45. ⟨anses-01874783⟩

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